|
Aρχεία Παθολογικής Ανατομικής, Τόμος 19ος, Τεύχη 1-3, 2005
Μελέτη της κινητικής των θυλακικών
και των γεννητικών κυττάρων
κατά την ανάπτυξη της ωοθήκης στον αρουραίο
Μπαλλά Μ., Αγγελοπούλου Ρ., Λαβράνος Γ., Κίττας Χ.
Εργαστήριο Ιστολογίας και Εμβρυολογίας Ιατρικής Σχολής Ε.Κ.Π.Α.
ΠΕΡΙΛΗΨΗ
Σκοπός: Μελέτη της κινητικής των γεννητικών και θυλακικών κυττάρων στην αναπτυσσόμενη ωοθήκη αρουραίων Wistar πριν και μετά τη γέννηση. Αξιολόγηση των πυρηνικών δεικτών Ki-67 και PCNA για τη διερεύνηση της μιτωτικής δραστηριότητας στη γονάδα και συσχέτιση των ευρημάτων με άλλες τεχνικές μελέτης του κυτταρικού πολλαπλασιασμού (καταμέτρηση μιτώσεων ανά οπτικό πεδίο, σήμανση με ραδιενεργό BrdU).
Υλικό και Μέθοδος: Ανίχνευση των πυρηνικών αντιγόνων PCNA και Ki-67 στα επιθηλιακά (θυλακικά) και τα γεννητικά κύτταρα ωοθήκης με τα αντιδραστήρια PC10 (Dako) και NCL-Ki-67 (Novocastra). Υπολογισμός του δείκτη σήμανσης, ανά κυτταρικό τύπο και οπτικό πεδίο, με το λογισμικό ανάλυσης εικόνας Image Pro Plus.
Αποτελέσματα: Κατά την εμβρυϊκή περίοδο, το ποσοστό (%) των αντιδρώντων γεννητικών κυττάρων στο PCNA αυξάνει από 71,19 στις 14,5 ημέρες πριν από τη γέννηση (ΗΠΓ) σε 75,66 στις 18,5 ΗΠΓ. Ακολούθως ελαττώνεται σημαντικά φθάνοντας κατά τη γέννηση το 28,57% (22 ημερών/ΚΓ). Μετά τη γέννηση, παρουσιάζει μία ελαφρά ανάκαμψη την 1η ημέρα (ΗΜΓ) της τάξης του 43,58%, η οποία αναστέλλεται με αποτέλεσμα την περαιτέρω ελάττωση του ποσοστού σε 18,41% την 7η ΗΜΓ και αυτή είναι η ελάχιστη τιμή. Με το Ki-67, το ποσοστό των αντιδρώντων γεννητικών κυττάρων είναι γενικά μικρότερο και η επιμέρους διακύμανση είναι παρόμοια. Ο δείκτης σήμανσης PCNA για τα θυλακικά κύτταρα, στην αναπτυσσόμενη ωοθήκη, αυξάνει μεταξύ 14,5 ΗΠΓ και 18,5 ΗΠΓ από 0,70 σε 28,90 και ελαττώνεται, μέχρι τις 20,5 ΗΠΓ σε 18,03. Κατά τη γέννηση ανέρχεται σε 27,66% και παραμένει σε υψηλά επίπεδα, μετά τη γέννηση, φθάνοντας το μέγιστο 49,22% την 7η ΗΜΓ. Για το Ki-67, το ποσοστό των αντιδρώντων επιθηλιακών κυττάρων, είναι γενικά μικρότερο με παρόμοια τάση μεταβολής.
Συμπεράσματα: H αντίδραση στο δείκτη PCNA είναι εντονότερη εκείνης που αφορά στο Ki-67, τόσο για τα θυλακικά κύτταρα, όσο και για τα κύτταρα της γεννητικής σειράς. Η μεγαλύτερη έκφραση του PCNA μπορεί να εκφράζει την αντίδραση των κυττάρων στα εκφυλιστικά κύματα που σημειώνονται στην ωοθήκη του αρουραίου, δεδομένης της συμμετοχής του στους μηχανισμούς επιδιόρθωσης του DNA. Η υπεροχή στην αντίδραση των γεννητικών κυττάρων στο PCNA, σε σχέση με τα θυλακικά, αντανακλά τη συνεχή μιτωτική δραστηριότητα των κυττάρων αυτών, μέχρι το τέλος της περιόδου μελέτης, σε αντίθεση με τα θυλακικά, τα οποία αντιδρούν με σχετική καθυστέρηση. Η διαφορά αυτή ίσως οφείλεται σε μια τοπική επαγωγή του επιθηλίου, μετά την άφιξη των αρχέγονων βλαστικών γεννητικών κυττάρων στην περιοχή της γοναδικής καταβολής.
Λέξεις κλειδιά: Ωοθήκη, γοναδική μορφογένεση, κυτταρικός πολλαπλασιασμός, μιτωτικός δείκτης, γεννητικά κύτταρα, θυλακικά κύτταρα.
Yποβλήθηκε: 19.09.2005
Εγκρίθηκε: 19.12.2005
|